摘要:建立小鼠弓形虫病模型后,将小鼠随机分成6组,统计小存活率及时间,再应用ELJSA检测血清中FNL2等胞因子水平,以检测桦褐孔菌多糖对感染弓形虫小鼠的治疗效果及对小队血清中FN-L2细胞因子水平的影｡结果表明,桦褐孔菌多中剂组小鼠存活最高;孔菌多的高中剂址FNy水平显著高于其他各组(P.01)高剂组L2水与其他各组比异显著(P0.01)除感染组外,其余各组FNy2均在第6天出现峰值｡说明孔菌多中剂量治疗形虫感染小效果最好,并且中剂可使小队血清中IFN-Y､IL-2值升高到适当水平,有效改善形虫感华对小的伤害｡
关键词:桦褐孔菌;多糖;治疗作用,弓形虫,细胞因子
中图分类号:S852.723文献标识码:A文章编号:0529-5130(2011)01-0020-04
基金项目:国家自然科学基金(30860211)｡
弓形虫病的危害在临床上非常严重,不仅可以导致先天疾病和人及家畜的流产,导致免疫缺陷病人的机会性死亡[!,而且还是导致病人脑损伤的主要原因,因此弓形虫病的治疗已引起国内外学者的高度重视｡目前弓形虫病治疗仍以化学药物为主,但在使用过程中会出现肝功能损害､致畸等毒副作用,不能长期服用,停药后复发率高[2]｡因此进一步探索高效低毒抗弓形虫药物甚为迫切｡中草药是我国医药的宝库,其毒副作用小,可长期治疗,在弓形虫病的治疗中有较多报道｡
本研究所采用的中药桦褐孔菌在民间广泛用来防治各种疑难杂症,如各种癌症､白血病､糖尿病等(3]｡研究表明桦褐孔菌还具有抗肿瘤抗病毒等作用(5),但关于抗寄生虫的报道甚少｡王明建等[61从4种中药中筛选抗形虫药物,筛选结果表明桦褐孔菌具有较好的抗弓形虫作用｡本试验在前人研究基础上,从桦褐孔菌多糖对感染马形虫小鼠的治疗作用及对其血清中细胞因子的影响等方面进行研究一方面为研究桦褐孔菌抗弓形虫药物的开发提供了理论依据;另一方面在分子免疫水平上初步探讨褐孔菌多糖抗弓形虫的作用机理｡
中､低剂量组,随治疗量的增加,IFN-y和L-2含量也随之增高｡高剂量组增加量最明显,然而高剂量的死亡率却高于中､低剂量组｡这种现象与Alexander的报道相似IL-4及L-10IFN-y对抗子,IL-4基因去除小鼠(IL-4-/-)感染形虫后死亡率明显高于IL-4+/+对照,脑组织炎性病理损害也更为严重｡说明虽然IFN-y在抗形虫过程中起着重要的作用,但IFN-Y的过度表达也可抑制炎症趋化因子,引起细胞内急性感染的免疫病理反应及细胞毒作用,从而使其机体损伤,存活率下降113]｡褐孔菌多糖中剂量组的IFN-y和IL-2水平低于高剂量组,高于低剂量组,且小鼠的存活率最高,表明其IFN-y含量既能有效地抑制虫体增殖,又不能引起病理免疫损伤,此剂量为桦褐孔菌多糖的最佳抗虫剂量｡
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本试验结果表明,桦褐孔菌多糖高､中､低剂量组均能延长感染弓形虫小鼠的存活时间,其中中剂量组效果最佳,低剂量组效果其次,高剂量组效果较差｡治疗效果与药物浓度不呈正相关｡在前期的桦褐孔菌多糖毒性试验已证实,在使用600mg/kg灌胃健康昆明种小鼠时,小鼠未出现死亡,说明桦褐孔菌高剂量的灌胃量并未对小鼠产生毒性作用｡因此高剂量治疗组死亡率增高的原因并不是由于高剂量桦褐孔菌多糖毒性造成的｡
弓形虫感染后,可诱发宿主体内多种细胞因子的表达,根据细胞因子在免疫调节中的作用,可分为免疫上调因子和免疫下调因子[7-8]｡在形虫不同感染时期,免疫上调因子和下调因子的表达水平及出现时间有所不同｡在速殖子急性感染初期,IFN-Y的mRNA在脑组织中星高表达,随之急剧下降9-10Haque等的研究发现,在感染早期,形虫可下调IL-2的产生及抑制T淋巴细胞的增殖反应,同时伴有Th2细胞因子IL-10表达的增高｡IN-y是抗形虫免疫中起主导作用的细胞因子,抗弓形虫保护免疫很大程度上依赖于IFN-y的表达｡IL-2形虫导活化的CD4*Thl细胞分,可促进T细胞增殖,刺激T细胞的溶细胞活性,刺激其产生IFN-y等多种细
据报道,蒿甲醚具有较好的抑制弓形虫速殖子复制的作用,并且该药在抗疟原虫病方面作用国内外也屡见报道115-16)｡本试验中蒿甲醚在治疗形虫感染时并未引起IFN-yIL-2平升,而IFN-Y和IL-2水平趋于正常动物的细胞因子水平｡这可能由于蒿甲醚在治疗时直接破坏了虫体,使速殖子数目减少,进一步降低宿主针对弓形虫所产生的免疫应答[17],减少了宿主体内产生IFN-Y和L-2,从而使宿主体内的免疫应答接近正常｡
胞因子[121本试验感染对照组IFN-Y的峰值出现在第4天试验中感染对照组小鼠的IFN-y略高于空白对照而3个桦褐孔菌多治疗组的IFN-峰值出现在第6组,说明急性弓形虫感染时,IFN-y量迅速升高,抑天,说明桦褐孔菌多糖能够延长IFN-y的mRNA表达制虫体增殖,但IL-2下调,随后产生了免疫抑制时间,延缓IFN-y水平的下降,进而延长小鼠的存活虫体量激增,导致小鼠死亡｡而桦褐孔菌多糖高､时间｡IL-2值的波动较IFN-y明显,表明不同时间IL-2活性有所不同,出现该现象的原因可能与形的毒力强弱及小鼠状态有关｡具体原因还有待进一步研究｡
4结论
桦褐孔菌多糖中剂量治疗弓形虫感染小鼠效果最好;桦揭孔菌多糖中剂量可使小鼠血清中IFN-Y､IL-2值升高到适当水平,有效改善形虫感染对小的伤害｡